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羊水干细胞分泌细胞因子及其对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响
作者:李宾公[1] 郑泽琪[1] 王梦洪[1] 彭景添[1] 施国祥[2] 
单位:南昌大学第一附属医院[1] 南昌大学一附院[2]  
文章号:W085202  
2013/3/28 17:19:22    
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摘要 背景:关于细胞移植的功效,重点在于其分泌的促增殖或抗凋亡的细胞因子,羊水干细胞能否分泌相关细胞因子有必要深入分析。

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背景:关于细胞移植的功效,重点在于其分泌的促增殖或抗凋亡的细胞因子,羊水干细胞能否分泌相关细胞因子有必要深入分析。 365医学网 转载请注明
目的:观察分离培养的羊水于细胞分泌细胞因子情况,及其对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的作用。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008—12,2009—06在南昌大学第一附属医院高血压病研究所完成。材料:10例剖宫产孕妇足月羊水,卯mU例,用于分离培养羊水干细胞,同时留取其产后脐静脉用于分离培养内皮细胞。取前均获孕妇知情同意。 365医学网 转载请注明
方法:①贴壁法分离培养羊水干细胞,达80%融合时胰酶消化传代,取传至第3代细胞,调整细胞密度为5x105 L-1,分为2组:缺氧羊水干细胞组通入体积分数为2%02+体积分数为5%C02+体积分数为93%N2,常规羊水干细胞组通入体积分数为5%C02+体积分数为95%空气,两组细胞37℃培养24 h,收集各自培养上清液及细胞以备分析。②取体外分离培养的第2代人脐静脉内皮细胞.以2x1 04细胞,孔的密度接种于12孔板,分为3组:对照组加入含体积分数为5%胎牛血清的EBM.2新鲜培养液2 mL,常规羊水干细胞组加入含体积分数为5%胎牛血清的EBM.2新鲜培养液1 mL+羊水千细胞培养液1 mL,缺氧羊水干细胞组加入含体积分数为5%胎牛血清的EBM一2新鲜培养液1 mL+缺氧诱导羊水干细胞培养液1 mL,培养3d,加入'0内,L肿瘤坏死因子a诱导细胞凋亡。主要观察指标:流式细胞仪测定羊水干细胞表面抗原表达,E LISA法测定羊水干细胞分泌血管内皮细胞生长因子、肝细胞生长因子情况,R.r.PCR法测定细胞因子mRNA的表达,检测内皮细胞增殖率及凋亡率。 365医学网 转载请注明
结果:培养7 d后羊水干细胞呈长梭形,以漩涡状、辐射状排列,第3代羊水干细胞呈CD29+,CDl05.,CD34.。常规培养的羊水干细胞可分泌血管内皮细胞生长因子、肝细胞生长因子;缺氧诱导条件下血管内皮细胞生长因子水平明显增加(P<0.01),其mRNA表达明显上调(P《O.05),而肝细胞生长因子含量及mRNA的表达均无明显变化(P>0.05)。与对照组比较,培养3 d后常规羊水干细胞组、缺氧羊水干细胞组内皮细胞数均明显增加(P<0.05),肿瘤坏死因子a诱导凋亡24 h后内皮细胞凋亡率均明显降低(P<0.05),且缺氧羊水干细胞组变化幅度大于常规羊水干细胞组(P‘0.05)。结论:羊水千细胞可分泌血管内皮细胞牛长因子、肝细胞生长因子,羊水千细胞培养液能促进内皮细胞增殖,抑制内皮细胞凋亡。经缺氧处理后,羊水干细胞分泌血管内皮细胞生长因子的能力增加,对内皮细胞的增殖和凋亡干预作用增强。 365医学网 转载请注明

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作者简介
李宾公
单位:南昌大学第一附属医院
简介:主任医师,博士研究生导师,博士。南昌大学赣江学者特聘教授,第一附属 医院心内科副主任,江西省心血管病
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